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Avances en la expresión de proteínas


Sesión de preguntas y respuestas con Pfenex, moderada por Amy Ritter

Las mejoras en las plataformas de expresión y las herramientas mejoradas para seleccionar clones están entre los avances de las pasadas décadas.

Los primeros pasos en la producción de cualquier proteína son la transfección de una línea celular, que logre la expresión de la proteína funcional y que seleccione un clon de alta expresión para la producción. Charles H. Squires, PhD, vicepresidente de descubrimiento y sociedades externas en Pfenex Inc., platicó con Pharmaceutical Technology acerca de los avances en la tecnología de expresión de proteínas, y discutió los retos aún por superar.

PharmTech: ¿Podrías describir cómo ha mejorado o cambiado el proceso de expresión de proteína durante los últimos 10 años? ¿Me podrías decir uno o dos avances tecnológicos clave que han hecho posibles estos cambios?

Squires: En la última década y media han proliferado nuevos métodos para expresar proteínas más rápida y confiablemente. Las innovaciones en esta área han incluido la mejora de los huéspedes de expresión para introducir más capacidad fenotípica y producir proteína activa, no degradada. Por ejemplo, los huéspedes han sido modificados para sobre-expresar moduladores de plegado o han sido mutados para eliminar las actividades proteolíticas. También, ha habido un gran incremento en el número de estas herramientas disponibles comercialmente, que ponen muchas estrategias efectivas al alcance de los investigadores con recursos limitados. Los últimos varios años han visto también el surgi-miento de tecnologías de plataforma patentadas, cada una de las cuales ofrece algunas ventajas en la expresión de proteínas difíciles o que entregan un proceso corriente abajo ventajoso. Ejemplos de esto incluyen plataformas tales como una cepa de Escherichia coli que secreta producto al espacio extracelular (Wacker Chemie AG), una caja de herra-mientas de promotores regulados en la levadura Pichia pastoris (VTU Technologies) y una plataforma de expresión completamente única basada en Pseudomonas fluorescens (Pfenex). La plataforma de Pfenex ha demostrado ser altamente efectiva en la expresión de una variedad de tipos de proteínas y emplea una tecnología de proceso paralela de alto rendimiento en la cual un millar o más de cepas de expresión única se construyen y analizan en alrededor de un mes.

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